狂犬病毒检测核酸检测方法介绍
狂犬病毒检测核酸检测RT-PCR 方法介绍:
以特异性扩增核蛋白(N)基因最保守区域为目的基因,设计一对 引物:N1(+):5’-587TTT GAG ACT GCT CCT TTT G605-3’; N2(-):5’-1092CC CAT ATA GCA TCC TAC605-3。唾液、脑脊液、皮肤或脑组织标本以及感染病毒后的细胞培养物 或鼠脑均可用于病毒核酸的检测。基本步骤如下:
待检标本用细胞总 RNA 分离试剂提取 病毒 RNA
再通过逆转录反应合成与目的基因 RNA 序列互补的 cDNA
PCR 循环特 异性扩增目的基因 cDNA
电泳检测 PCR 扩增产物,判断检测结果。
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